Elisa實(shí)驗(yàn)：競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)抗體的原理

　　以下是ELISA競(jìng)爭(zhēng)法檢測(cè)抗體的原理詳解：

　　一、核心原理?

　　競(jìng)爭(zhēng)法的核心在于?抗原-抗體的競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合?，其反應(yīng)機(jī)制為：

　　固相抗原?：預(yù)先包被在酶標(biāo)板上的抗原作為固定結(jié)合位點(diǎn)?

　　競(jìng)爭(zhēng)過程?：

　　樣本中的待測(cè)抗體(未標(biāo)記)與酶標(biāo)抗體(標(biāo)記抗體)同時(shí)與固定抗原結(jié)合

　　待測(cè)抗體濃度越高，結(jié)合的酶標(biāo)抗體越少，顯色越弱(顯色強(qiáng)度與待測(cè)抗體濃度成反比)?

　　二、關(guān)鍵步驟?

　　固相抗原包被?：將抗原固定于酶標(biāo)板孔內(nèi)?

　　競(jìng)爭(zhēng)孵育?：加入樣本(含待測(cè)抗體)與酶標(biāo)抗體混合液，孵育后形成競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合?

　　顯色檢測(cè)?：

　　結(jié)合的酶標(biāo)抗體催化底物顯色

　　顏色越深，說明待測(cè)抗體越少;顏色越淺，待測(cè)抗體越多?

　　三、結(jié)果判讀要點(diǎn)?

　　現(xiàn)象? ?解釋? ?示例?

　　樣本孔顯色深 待測(cè)抗體少，酶標(biāo)抗體結(jié)合多 陰性樣本

　　樣本孔顯色淺 待測(cè)抗體多，酶標(biāo)抗體結(jié)合少 陽(yáng)性樣本

　　四、與夾心法的區(qū)別?

　　競(jìng)爭(zhēng)法?：顯色強(qiáng)度與待測(cè)物濃度?成反比?，適用于小分子抗原或抗體檢測(cè)?

　　夾心法?：顯色強(qiáng)度與待測(cè)物濃度?成正比?，適用于大分子抗原檢測(cè)?

　　以上原理綜合了抗原抗體競(jìng)爭(zhēng)機(jī)制與顯色反比關(guān)系，適用于抗體定量檢測(cè)場(chǎng)景。

　　注：以上資料僅供參考，不作為實(shí)驗(yàn)依據(jù)，具體產(chǎn)品資料請(qǐng)咨詢技術(shù)老師或品牌供應(yīng)商。

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